自Thomas Graham 1861年發明透析方(fang)法至今(jin)已有一百多年。透析已成為生物(wu)化學實驗室簡便常(chang)用的(de)分離(li)純(chun)化技術之一。在生物(wu)大分子的(de)制(zhi)備過程中，除(chu)(chu)鹽、除(chu)(chu)少量有機溶(rong)劑(ji)、除(chu)(chu)去生物(wu)小分子雜(za)質和(he)濃縮樣品等都要用到透析的(de)技術。
透析(xi)(xi)的(de)(de)(de)動力(li)是(shi)擴(kuo)散壓，擴(kuo)散壓是(shi)由(you)橫跨膜(mo)兩(liang)邊的(de)(de)(de)濃度(du)(du)梯度(du)(du)形(xing)成的(de)(de)(de)。透析(xi)(xi)的(de)(de)(de)速度(du)(du)反比(bi)(bi)于(yu)膜(mo)的(de)(de)(de)厚度(du)(du)，正比(bi)(bi)于(yu)欲(yu)透析(xi)(xi)的(de)(de)(de)小分子溶質在膜(mo)內外兩(liang)邊的(de)(de)(de)濃度(du)(du)梯度(du)(du)，還正比(bi)(bi)于(yu)膜(mo)的(de)(de)(de)面積和(he)溫度(du)(du)，通常是(shi)4℃透析，升高溫度可加(jia)快透析速度。
透(tou)(tou)(tou)析(xi)膜可(ke)用(yong)動物(wu)(wu)膜和玻璃紙等，但用(yong)的多的還(huan)是(shi)用(yong)纖維素制成的透(tou)(tou)(tou)析(xi)膜，目前(qian)常用(yong)的是(shi)美(mei)國Union Carbide （聯合碳化物(wu)(wu)公(gong)司）和美(mei)國光(guang)譜醫(yi)學(xue)公(gong)司生產的各種尺寸的透(tou)(tou)(tou)析(xi)管，截留分(fen)(fen)子量(liang)MwCO（即留在(zai)透(tou)(tou)(tou)析(xi)袋內的生物(wu)(wu)大分(fen)(fen)子的小分(fen)(fen)子量(liang)，縮寫(xie)為MwCO）通常為1萬左右。
商品透(tou)析袋制成管狀，其扁(bian)平寬(kuan)度為23 mm～50 mm不等(deng)。為防干裂，出廠時都用(yong)(yong)(yong)10％的(de)(de)甘(gan)油處理過，并(bing)含有(you)極微量的(de)(de)硫化(hua)物、重金屬和一(yi)些具有(you)紫外吸收(shou)的(de)(de)雜質，它們對蛋(dan)白質和其它生物活性物質有(you)害，用(yong)(yong)(yong)前必須(xu)除去。可先用(yong)(yong)(yong)50％乙醇(chun)煮沸1小時，再依次用(yong)(yong)(yong)50％乙醇(chun)、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌，后用(yong)(yong)(yong)蒸餾(liu)水(shui)沖(chong)洗即可使(shi)用(yong)(yong)(yong)。實驗證(zheng)明，50％乙醇(chun)處理對除去具有(you)紫外吸收(shou)的(de)(de)雜質特別(bie)有(you)效(xiao)。使(shi)用(yong)(yong)(yong)后的(de)(de)透(tou)析袋洗凈后可存于(yu)4℃蒸餾水中，若長時(shi)間不(bu)用(yong)，可(ke)加少(shao)量(liang)NaN2，以防(fang)長菌。洗(xi)凈(jing)涼干的(de)透析袋彎折時(shi)易(yi)裂口，用(yong)時(shi)必須仔細檢(jian)查，不(bu)漏時(shi)方可(ke)重復(fu)使用(yong)。 
新透析袋如(ru)(ru)不作(zuo)如(ru)(ru)上的特殊處理(li)，則可(ke)用沸(fei)水煮五至十分鐘(zhong)，再用蒸餾(liu)水洗凈，即可(ke)使(shi)用。使(shi)(shi)用(yong)時(shi)(shi)，一(yi)(yi)端(duan)用(yong)橡皮筋或線(xian)繩扎緊，也可(ke)以使(shi)(shi)用(yong)特制(zhi)的(de)(de)(de)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)袋夾夾緊，由(you)另一(yi)(yi)端(duan)灌(guan)滿水(shui)，用(yong)手指稍加壓，檢(jian)查不漏，方可(ke)裝入待(dai)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)液(ye)(ye)，通(tong)常要留三分之一(yi)(yi)至一(yi)(yi)半的(de)(de)(de)空間，以防透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)過程中，透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)的(de)(de)(de)小分子(zi)量(liang)較大時(shi)(shi)，袋外(wai)的(de)(de)(de)水(shui)和緩沖(chong)液(ye)(ye)過量(liang)進(jin)入袋內將袋漲破。含鹽量(liang)很高的(de)(de)(de)蛋白質溶液(ye)(ye)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)過夜(ye)時(shi)(shi)，體積增加50％是正常的(de)(de)(de)。為了加快透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)速度，除多次更換(huan)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)液(ye)(ye)外(wai)，還可(ke)使(shi)(shi)用(yong)磁子(zi)攪拌。透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)的(de)(de)(de)容器(qi)要大一(yi)(yi)些，可(ke)以使(shi)(shi)用(yong)大燒杯、大量(liang)筒和塑(su)料桶。小量(liang)體積溶液(ye)(ye)的(de)(de)(de)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)，可(ke)在袋內放一(yi)(yi)截兩(liang)頭燒園的(de)(de)(de)玻(bo)璃棒或兩(liang)端(duan)封口(kou)的(de)(de)(de)玻(bo)璃管，以使(shi)(shi)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析(xi)袋沉入液(ye)(ye)面以下。
檢(jian)查(cha)透析效果的(de)方法是：用1％ BaCl2檢(jian)查(cha)(NH4)2SO4，用1％ AgNO3 檢(jian)查(cha)NaCl、KCl等。
為了提高透(tou)析(xi)效率(lv)，還(huan)可以使(shi)(shi)用各(ge)種透(tou)析(xi)裝置(zhi)。使(shi)(shi)用者也可以自行設計與(yu)制作(zuo)各(ge)種簡易(yi)的透(tou)析(xi)裝置(zhi)。美國(guo)生物醫學公司（Biomed Instruments Inc.）生產(chan)的各(ge)種型號的Zeineh 透(tou)析(xi)器，由(you)于使(shi)(shi)用對流透(tou)析(xi)的原理，使(shi)(shi)透(tou)析(xi)速(su)度和效率(lv)大大提高
透析袋使用前(qian)如何處理
透析(xi)袋的使(shi)用(yong)前(qian)處理：
1. 把透析袋(dai)剪成(cheng)適當長度（10-20cm）的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸(suan)氫(qing)鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水*清(qing)洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中(zhong)將之(zhi)煮沸10分鐘。
5. 冷卻后，存放于4度，必須確(que)保透析袋始終浸沒在(zai)溶(rong)液內。從此時起取用透析袋是必須戴手套(tao)。
6. 用前(qian)在透析袋內裝滿水然后排出，將之清洗干凈。
透析膜 (前處理方法如下)：
1. 戴手套把透析(xi)膜剪(jian)成適當長(chang)度，浸(jin)在蒸餾(liu)水中 15 min 泡軟(ruan)。
2. 浸(jin)入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加熱至 80℃，一(yi)邊攪拌至少 30 min。
3. 換到 10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min，以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次(ci)。
4. 再用 80℃ 蒸餾(liu)水洗(xi) 30 min，然后(hou)換到 20% 酒精中，放在 4℃ 冰箱中保存。
一(yi)、截(jie)留(liu)分子量(MWCO)說明：
由于透(tou)析膜由海綿狀橫向(xiang)耦(ou)合的(de)(de)聚合物材料構(gou)成，截留(liu)性能間接的(de)(de)由孔(kong)徑等級即截留(liu)分(fen)子(zi)(zi)量(MWCO)表(biao)示(shi)，截留(liu)率(lv)90%的(de)(de)溶(rong)質(zhi)分(fen)子(zi)(zi)大(da)小(xiao)可(ke)更(geng)精(jing)確的(de)(de)表(biao)示(shi)膜的(de)(de)MWCO。然而(er)，溶(rong)質(zhi)的(de)(de)滲透(tou)性亦取決于分(fen)子(zi)(zi)形(xing)狀、水合度、離子(zi)(zi)電荷與極(ji)性，我們推(tui)薦選擇(ze)膜的(de)(de)MWCO為欲截留(liu)物質(zhi)分(fen)子(zi)(zi)量的(de)(de)一(yi)半，兩倍于透(tou)過物質(zhi)的(de)(de)分(fen)子(zi)(zi)大(da)小(xiao)。
二(er)、 透析袋膜材質說明：
1、生物技術纖維素酯(CE)膜
生(sheng)物(wu)學惰性和超純的生(sheng)物(wu)技(ji)術CE膜(mo)提供(gong)廣泛的可選孔徑(9種)和尺寸，用(yong)(yong)于帶電荷分子(zi)的分離及大分子(zi)純化。3種尺寸中，生(sheng)物(wu)技(ji)術CE膜(mo)對條件及溶(rong)劑(ji)要(yao)求較高(gao)。一(yi)般而言(yan)，CE膜(mo)能夠抗弱的或稀的酸堿溶(rong)液和輕微乙醇，MWCO只有(you)輕微改(gai)變。直接(jie)與有(you)機溶(rong)劑(ji)接(jie)觸會破壞CE膜(mo)。生(sheng)物(wu)技(ji)術CE膜(mo)只能在pH2-9與4-37℃下使用(yong)(yong)。即用(yong)(yong)透析裝置中也可使用(yong)(yong)CE膜(mo)。
2、生物技術再生纖維素(su)(RC)膜
生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)技術RC膜(mo)通過(guo)再(zai)生(sheng)(sheng)(sheng)過(guo)程制得(de)，物(wu)(wu)(wu)理抗性與(yu)(yu)化學相(xiang)容性得(de)到改良(liang)，具有(you)(you)與(yu)(yu)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)技術CE膜(mo)一樣高純度(du)與(yu)(yu)均(jun)一的MWCO。RC膜(mo)能夠(gou)與(yu)(yu)高濃度(du)的弱酸(suan)(suan)堿、低濃度(du)的強酸(suan)(suan)堿、大多數醇類及一些(xie)溫(wen)和的或低濃度(du)有(you)(you)機會(hui)溶劑共用(yong)(yong)，直接(jie)與(yu)(yu)強極性或有(you)(you)機會(hui)溶劑接(jie)觸會(hui)破壞RC膜(mo)。生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)(wu)技術RC膜(mo)能在pH2-12與(yu)(yu)4-60℃條件(jian)下使用(yong)(yong)。
3、標(biao)準等(deng)級再生(sheng)纖維素RC膜：Spectra/Por 1-7
標準等級再生纖維(wei)(wei)素(RC)由從(cong)棉毛纖維(wei)(wei)提取的天然纖維(wei)(wei)素構(gou)成，可廣泛應用(yong)(yong)(yong)于實驗室透析。這種(zhong)透明、柔(rou)韌的膜(mo)孔(kong)徑均一且低廉(lian)、結(jie)實，非常適用(yong)(yong)(yong)于脫鹽、緩(huan)沖液(ye)置換、大分子純化及(ji)其他一般應用(yong)(yong)(yong)。由于具有廣泛的化學相(xiang)容(rong)性，標準RC膜(mo)能夠(gou)與稀強酸(suan)堿液(ye)、高濃度的弱酸(suan)和(he)弱堿、大多數醇類及(ji)一些(xie)溫和(he)的或低濃度有機溶(rong)劑(ji)(包括DMSO)共(gong)用(yong)(yong)(yong)，但與一些(xie)強有機溶(rong)劑(ji)接觸可能會破(po)壞(huai)RC膜(mo)，標準RC膜(mo)能夠(gou)在pH2-12和(he)4-121℃條件下使用(yong)(yong)(yong)。
三、 使用(yong)說明：
1、使用(yong)過(guo)程中請務(wu)必帶(dai)上(shang)無裂縫的(de)手套，使用(yong)后請及時洗手！
2、濕型(xing)透析(xi)袋保存時(shi)必須浸泡在0.05%疊氮鈉防腐溶液中，失水后將不能使(shi)用！
3、美(mei)國美(mei)國光譜醫學公司生(sheng)產的透析袋(dai)大部分是(shi)預處理(li)過(guo)的，基本(ben)不含硫化(hua)物和重金(jin)屬離子，浸泡(pao)在0.05%疊氮鈉防腐溶液中(zhong)，使(shi)用(yong)前只需用(yong)冷(leng)卻(que)(que)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)沖洗3次即可(ke)使(shi)用(yong)；若是(shi)干型(xing)的，是(shi)涂有甘油保護層，可(ke)在60℃左(zuo)右的溫水(shui)(shui)中(zhong)浸泡(pao)10分鐘后用(yong)冷(leng)卻(que)(que)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)(shui)沖洗3次即可(ke)使(shi)用(yong)。請勿將光譜醫學的透析袋(dai)放到沸水(shui)(shui)中(zhong)煮沸或者放到有機溶劑中(zhong)處理(li)，以防損(sun)壞膜(mo)材質！
4、使用(yong)(yong)時，一(yi)端用(yong)(yong)橡(xiang)皮(pi)筋(jin)或(huo)(huo)線繩扎緊，推(tui)薦(jian)使用(yong)(yong)特(te)制的(de)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析袋(dai)夾子(zi)夾緊，由另一(yi)端灌滿水，用(yong)(yong)手指(zhi)稍加(jia)壓，檢(jian)查不(bu)漏，方可裝入待透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析液(ye)，通常要留三(san)分之一(yi)至一(yi)半的(de)空(kong)間(jian)，以(yi)防透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析過程中，透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析的(de)小分子(zi)量(liang)較大(da)時，袋(dai)外(wai)的(de)水和緩(huan)沖液(ye)過量(liang)進(jin)入袋(dai)內(nei)將袋(dai)漲(zhang)破。含鹽量(liang)很高的(de)蛋白質溶液(ye)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析過夜時，體(ti)積增加(jia)50％是正常的(de)。為了加(jia)快透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析速度(du)，除(chu)多次更(geng)換透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析液(ye)外(wai)，還(huan)可使用(yong)(yong)磁(ci)子(zi)攪拌。透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析的(de)容(rong)器要大(da)一(yi)些，可以(yi)使用(yong)(yong)大(da)燒杯、大(da)量(liang)筒(tong)和塑料桶。小量(liang)體(ti)積溶液(ye)的(de)透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析，可在袋(dai)內(nei)放一(yi)截兩頭燒園的(de)玻璃(li)棒或(huo)(huo)兩端封(feng)口的(de)玻璃(li)管，以(yi)使透(tou)(tou)(tou)(tou)(tou)析袋(dai)沉入液(ye)面以(yi)下。
一、透析的(de)定(ding)義(yi)：
透(tou)析(xi)（dialysis）是指(zhi)物質穿(chuan)過(guo)膜(mo)的選擇性擴(kuo)散過(guo)程。可用(yong)于分(fen)(fen)(fen)(fen)離分(fen)(fen)(fen)(fen)子量大小不(bu)同的溶(rong)質，低于膜(mo)所截留閾(yu)值分(fen)(fen)(fen)(fen)子量的物質可擴(kuo)散穿(chuan)過(guo)膜(mo)，高于膜(mo)截留閾(yu)值分(fen)(fen)(fen)(fen)子量的物質則被保留在半透膜(mo)的另一(yi)側。 
二、透析袋：
透(tou)析只需(xu)要使用(yong)(yong)的(de)半透(tou)膜即可完成(cheng)。通常(chang)是(shi)將半透(tou)膜制(zhi)成(cheng)袋狀(zhuang)，就叫做透(tou)析袋。在生物大分子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)過程(cheng)中，除(chu)(chu)鹽、除(chu)(chu)少量有機溶劑、除(chu)(chu)去生物小分子(zi)雜質(zhi)和(he)濃縮樣品(pin)等都要用(yong)(yong)到透(tou)析的(de)技術。比如蛋白質(zhi)和(he)DNA的脫鹽濃縮，納米材(cai)料的篩(shai)選，中藥(yao)成分(fen)萃(cui)取(qu)后有(you)機(ji)溶劑(ji)的去處等。 
三、透析方法
透(tou)(tou)析只需(xu)要(yao)使用的(de)半透(tou)(tou)膜即可完成(cheng)。通常是(shi)將半透(tou)(tou)膜制成(cheng)袋(dai)(dai)(dai)狀，將生物大(da)分(fen)子(zi)樣品溶液置入(ru)袋(dai)(dai)(dai)內(nei)，將此透(tou)(tou)析袋(dai)(dai)(dai)浸入(ru)水或緩沖液中(zhong)，樣品溶液中(zhong)的(de)大(da)分(fen)子(zi)量的(de)生物大(da)分(fen)子(zi)被截留在袋(dai)(dai)(dai)內(nei)，而鹽和小(xiao)分(fen)子(zi)物質不斷擴散透(tou)(tou)析到(dao)袋(dai)(dai)(dai)外(wai)(wai)，直(zhi)到(dao)袋(dai)(dai)(dai)內(nei)外(wai)(wai)兩(liang)邊的(de)濃度(du)達到(dao)平衡為止。保(bao)留在透(tou)(tou)析袋(dai)(dai)(dai)內(nei)未透(tou)(tou)析出的(de)樣品溶液稱為“保(bao)留(liu)液”，袋(dai)（膜）外的(de)溶液稱為“滲(shen)出液”或“透析液”。通(tong)過多次更換(huan)透析液而去除鹽(yan)和小分(fen)子物質(zhi)
透析(xi)袋(dai)使用(yong)說明 
透析(xi)即用半透膜（透析(xi)袋）將大分(fen)子(zi)(zi)蛋白質(zhi)分(fen)離(li)出來。在(zai)生物大分(fen)子(zi)(zi)制備過程中除去鹽、少量有機溶劑、生物小分(fen)子(zi)(zi)雜質(zhi)和濃縮樣(yang)品，透析(xi)法簡單。
技術指標(biao)：MWCO（截留分子(zi)量），單位(wei)Diatoms。
透(tou)(tou)析(xi)(xi)(xi)時，小于MWCO的(de)分子在(zai)透(tou)(tou)析(xi)(xi)(xi)膜二邊(bian)溶液濃度(du)(du)(du)差產生的(de)擴散壓作用(yong)(yong)下透(tou)(tou)過(guo)滲(shen)透(tou)(tou)膜、其速(su)度(du)(du)(du)與(yu)濃度(du)(du)(du)梯度(du)(du)(du)、膜面積(ji)及(ji)溫(wen)度(du)(du)(du)成正比。欲(yu)快速(su)滲(shen)透(tou)(tou)可采(cai)用(yong)(yong)直徑較小的(de)透(tou)(tou)析(xi)(xi)(xi)袋以增(zeng)加膜面積(ji)。常用(yong)(yong)溫(wen)度(du)(du)(du)：4℃，升溫(wen)、更換袋外透(tou)(tou)析(xi)(xi)(xi)液或用(yong)(yong)磁力攪拌器，均(jun)能提高透(tou)(tou)析(xi)(xi)(xi)速(su)度(du)(du)(du)。
使(shi)用須(xu)知(zhi)
高精(jing)度即(ji)用型無須前處理(li)，用蒸餾水(shui)沖洗即(ji)可使用。
注(zhu)意：CE型(xing)材質較(jiao)硬（洗滌(di)時(shi)小(xiao)心破(po)裂）。
1. 某些化學物質會(hui)破壞透析袋微孔(kong)切不可逆(ni)轉。計有(you)：
烴(jing)、鹵化烴(jing)、醇(chun)、酮、酯、胺、二氧(yang)雜環、等。
酸（甲乙酸、稀強酸如5%HCL），10%萘酚(fen)，
甲醇、乙醇：濃(nong)度小于5%時，透析(xi)袋功能在，而MWCO變化(hua)。
2. 蛋白質吸附量，小于1μg/克（以透(tou)析袋干重計）。
正常使用PH值5-9。
極限使用PH值2-12。
3. 前處理：煮沸5分(fen)鐘后用蒸餾(liu)水(shui)60℃沖(chong)洗2分(fen)鐘，置于(yu)4℃蒸餾(liu)水(shui)中待(dai)用。長期保存液：0.05%-1%疊(die)氮鈉，1mMEDTA或50%甘油，溫度(du)（4℃），使(shi)用前以蒸餾(liu)水(shui)洗凈。
4. 即(ji)用型透析袋(dai)無需(xu)前(qian)處理(li)，使用前(qian)用蒸餾(liu)水沖(chong)凈即(ji)可(ke)。
5. 透析(xi)袋裝(zhuang)液時(shi)應留1/3-1/2空間，以防透析(xi)過程中，袋外的水和緩沖液過量(liang)進(jin)入袋內將袋漲破（含鹽量(liang)高的蛋白質溶液透析(xi)過ye時(shi)，體積(ji)增加50%系(xi)正(zheng)常情況）。
6.使用時需帶手套
7.透析效果檢(jian)查用